层析柱(层析柱厂家)
砂芯层析柱优缺点
1、直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。
2、层析柱砂芯堵了可以用水反冲洗,或用稀盐酸浸泡后再反冲。
3、保护好玻璃器皿。使用砂芯层析柱时,轻拿轻放,并注意保护好其它玻璃器皿。水浴时因茚三乙醇溶液挥发易引起手部皮肤染色,请尽量用试管夹或毛巾取放试管。
层析柱需要加滤膜吗
1、需要将透析后的样品高速离心或者点45膜过滤后再上样层析柱,层析柱柱头上方有一层保护填料的膜。有沉淀的样品很容易先堵塞上膜,造成其余样品无法进入而堵塞柱子。
2、脱盐柱可以重复使用。该层析柱虽是一次性使用,但是也可以重复再生使用。去离子水洗5个柱体积;0.5M氢氧化钠清洗2-3柱体积;去离子水清洗3个柱体积;再用20%乙醇洗柱5个柱体积。
3、所以在使用超滤方法时要选择合适的滤膜,也可以选择切向流过滤得到更理想的效果 离心也是经常和其它方法联合使用的一种分离蛋白质的方法。当蛋白质和杂质的溶解度不同时可以利用离心的方法将它们分开。
4、根据柱效理论分析,基质粒度小,塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小,会提高分辨率的道理。再者,高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60C,通过改善传质速度,缩短分析时间,就可增加层析柱的效率。
5、第四,敲柱子。用橡皮管敲击柱子,赶走层析柱中的气泡,然后打开活塞,流出洗脱液,柱子不可抽干,关闭活塞,就可以加样了。通常如果拌硅胶时加的洗脱液较多,是不会有气泡的 高压湿法就是接个真空泵,操作起来更加高效。
层析柱装柱流程
活化后的硅胶加石油醚浸泡并搅拌均匀。在装柱时,宜使用口径较大的玻璃漏斗置于 层析柱上部,注入1/2高的石油醚,打开下部活塞,然后尽量均匀地将硅胶倾入漏斗,这样可以防止层析柱中形成断层(这一步是实验的关键步骤)。
湿法装柱很简单。第一,塞棉花。取一小块脱脂棉(或者玻璃纤维)铺平,弄成和层析柱直径一样的圆形,放入层析柱底部,用一根较长的玻璃棒压着棉花,关闭层析柱活塞,加一点洗脱液浸润棉花,赶走棉花中的空气。
湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂走柱子,本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡。